前期準備

 

儀器調(diào)試：先將儀器放置在水平穩(wěn)定的工作臺，連接電源和配套電腦，安裝對應(yīng)的驅(qū)動與操作軟件后啟動設(shè)備。首次使用或長期閑置后，讓儀器預(yù)熱1-2分鐘穩(wěn)定光學(xué)系統(tǒng)；若儀器挪動過，還需在軟件中重新調(diào)節(jié)對焦距離等基礎(chǔ)參數(shù)。

 

樣本制備：對于貼壁細胞，先用胰酶溫和消化后終止反應(yīng)，懸浮細胞則直接輕柔吹打，避免細胞團聚；若需區(qū)分活死細胞，按1:1比例將細胞懸液與臺盼藍染色液混合，染色后1-2分鐘內(nèi)盡快檢測。同時確保細胞濃度在儀器檢測范圍（通常1×10?-1×10?cells/mL），過高需梯度稀釋，過低可離心濃縮。

 

樣本加載與參數(shù)設(shè)置

 

加載樣本：取儀器專用計數(shù)板，用移液器吸取10-25μL制備好的細胞懸液，垂直滴加至計數(shù)板的加樣孔，借助毛細作用填充計數(shù)腔，過程中避免產(chǎn)生氣泡和觸碰計數(shù)腔表面。隨后手持計數(shù)板兩側(cè)，按儀器標(biāo)識的方向平穩(wěn)插入進樣口，直至卡入到位。

 

參數(shù)選擇：在軟件界面根據(jù)樣本類型（如哺乳動物細胞、酵母細胞）和檢測需求（如明場計數(shù)、熒光計數(shù)）選擇預(yù)設(shè)應(yīng)用模板。若為自定義檢測，可手動調(diào)整細胞直徑范圍、活死細胞判別閾值，熒光型號還需匹配對應(yīng)熒光通道。

 

啟動檢測與結(jié)果核對

 

開始計數(shù)：參數(shù)設(shè)置完成后，點擊軟件上的“計數(shù)”或“開始實驗”按鈕，儀器會自動完成對焦、圖像捕獲和分析，整個過程通常在數(shù)十秒內(nèi)完成。部分儀器檢測結(jié)束后計數(shù)板會自動退出，需及時取出。

 

結(jié)果核對：重點查看軟件顯示的細胞標(biāo)記圖像，確認活死細胞的標(biāo)記是否準確，排查是否有雜質(zhì)被誤判為細胞或細胞漏判的情況。同時查看核心數(shù)據(jù)，如總細胞濃度、活細胞率、平均細胞直徑等，若結(jié)果異常，可調(diào)整參數(shù)后重新檢測。

 

數(shù)據(jù)處理與儀器清理

 

數(shù)據(jù)保存：確認結(jié)果無誤后，將數(shù)據(jù)按需求導(dǎo)出為PDF、CSV等格式，標(biāo)注樣本名稱、檢測時間等信息以便存檔，部分儀器支持插入U盤導(dǎo)出數(shù)據(jù)，也可直接在軟件中查看歷史檢測記錄。

 

后續(xù)清理：將使用過的計數(shù)板按生物危害廢棄物規(guī)范處理；若儀器載物臺或進樣口有液體濺出，用無絨軟布輕輕擦拭，定期清潔儀器光學(xué)窗口，保障后續(xù)檢測精度。最后按流程關(guān)閉軟件和儀器電源，整理好實驗耗材。